自体脂肪填充研究
近年,学者们都在研究提高移植脂肪成活率的有影响因子,以下整齐网小编列举5种主要的因素,但结果并不都很积极。
1.富血小板血浆(platelet-richPlasma, )
提到prp不得不先提到水光补水,已经证实,有显著减少皱纹、增加皮肤厚度的作用。所以在皮下注射玻尿酸(也就是水光补水)时加入prp有事半功倍的作用。
能促进移植脂肪组织局部的血管再生,增加脂肪组织的质量保持率,减少脂肪移植后的纤维坏死程度。然而,有的学者做同样的实验,结果却是没能提高移植成活率,其重量、 体积、组织学观察指标都没有显著改变。所以,对脂肪移植的影响还存在不确定性。一般都医院都做的是与脂肪单次混合移植的方法,但此法会导致在短时间内被快速吸收,生物作用低下,从而不能发挥更好的作用。
有学者采用了连续多次辅助自体脂肪移植的方法,即在优先混合移植后的第5、10天分别再次补充注射,且与优先注射量相同。实验结果表明连续多次注射prp的确在90天前有明X果,但在180后与单次注射prp脂肪移植形态基本相同……
2.脂肪(adipose-derived stem cells, ASCs)
在移植中加入大家都已熟知,不懂医的人也知道具有多向分化潜能,说俗点它就是“变形金刚”。
ASCs在脂肪游离移植中的确有作用。ASCs可以分化为体积较大的成熟脂肪细胞,补充移植过程中损伤坏死的脂肪细胞,进而维持移植物的体积,移植后良好的长期果。
以下为姑娘们介绍实验室提纯脂肪的实验步骤,非医学专业可以略过。我的目的是让手术时间透明化,不希望姑娘们以为自己手术加了,其实就仅仅是单纯填充而已:制备1小时30分钟左右,那么从抽脂开始的全部手术时间应该是在3小时以上,如果只有2个多小时手术时间,要么就是没加要么就是糊弄提纯,当然并不应该,也许是我动作慢呢!
目前应用较广泛的ASCs分离纯化方法是胶原酶消化法。
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(1)吸脂手术中获取的皮下脂肪组织,用PBS反复冲洗脂肪组织,至无血色为止。
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(2)分装至50ml离心管中,用1200r/min,离心5min。离心后分组织为四层,由上至下依次分为油脂层、脂肪层、生理盐水层、细胞沉淀层。弃去油脂层,将脂肪层重新收集至离心管中。
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(3)用电子天平称取I型胶原酶加入生理盐水搅拌,使胶原酶充分溶解配置成0.1%浓度,用无菌注射器抽取胶原酶溶液,通过0.22|I m滤器除菌。按1:1比例加入胶原酶溶液,充分振荡离心管使胶原酶与脂肪混匀后,放入37°C水浴箱或5%C0培养箱中消化45min,期间每l0min取出摇匀一次。
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(4)脂肪消化成黏糊状,用1200r/min离,L,l0min。离心后组织由上而下分为三层,依次为脂肪层、生理盐水层、沉淀层。弃去上两层,取各个离心管内沉淀层,置于同一离心管内。
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(5)加入生理盐水至20ml,用70um滤网过滤。1200r/min,离心5min,留沉淀细胞。(此步骤重复3次)
看起来麻烦实际操作是很流畅的。
3.血管基质层细胞(stomal vascular fraction cells,SVF )
这个姑娘们应该都很陌生,百度百科我就不复制粘贴了。SVFs也来源于脂肪,但是它相对于脂肪更加容易制备、价格低廉。
但是这个临床好像没有用的,但还是要附上SVFs制备步骤,以便姑娘们对照自己手术到底加没加,不要被收取“莫须有”的费用。
人SVFs的新鲜分离及获取:将脂肪抽吸物的脂质部分,用PBS冲洗,l000 r/min离心3min, 离心半径13 cin,去除下层灌洗液及上层油脂,取中间的脂肪颗粒约l0ml,将其中6ml用0.25%I型胶原37°C恒温摇床消化30min,期间需反复震荡混匀2~3次,等量体积的完全培养基中和,200目筛网过滤, 1200 g/rain离心5 rain,离心半径13 cm,以去除悬浮的脂肪细胞、脂滴及细胞杂质。去上清,取沉淀 I ml全培混悬,加入6倍体积的红细胞裂解液,混匀后室温下孵育6min,l200 g/rain离心5 rain,离心半径13 cm,去上清,再以适量DMEM完全培养基重悬沉淀,得到新鲜分离的SVFs悬液。
4.丹参、黄芪注射液
我之前已经说过影响成活率的主要是血晕,这俩味药都是活血化瘀的常用药,能改良微循环。本实验结果中,丹参组的脂肪型态比黄芩好,但是血供却不如黄芩组的丰富,这不免让人怀疑丹参脂肪型态是否全是脂肪细胞,是不是引起了其它细胞的增长,从而型态上果好……我猜看到这一定有妹子要回去自己熬中药喝了,剂量和次数你都不知道就不要乱喝了,喝多了肝无法排除会导致变成“黄脸婆”的。
5.VEGF复合藻酸钙
VEGF是血管内皮,该实验证明了藻酸钙的确具有促进血管内皮的作用,提高注射部位的血供。但是,这俩混合在一起是一种凝胶物质,和脂肪一起填是要占地方的,在兔子身上做没问题,毕竟不考虑形态。但是在人脸上,无法判断哪里是凝胶哪里是脂肪,较后这凝胶百分百是要降解的,那万一脂肪成活很好,脸就变成月球表面了……
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